神奇濾布Miracloth是一種孔徑為22-25微米的聚酯人造纖維濾布,除了可以用于分離原生質(zhì)體、細(xì)胞勻漿 過(guò)濾、核酸純化等等,還有一些有趣的用途.
基因工程轉(zhuǎn)化真菌和一些土壤細(xì)菌時(shí),往往需要先消化掉厚厚的細(xì)胞壁,制備分離原生質(zhì)體以便進(jìn)行轉(zhuǎn)化, 即使是大家很熟悉的酵母轉(zhuǎn)化,當(dāng)簡(jiǎn)便的醋酸鋰方法不起作用時(shí),原始也是有效方法還是原生質(zhì)體轉(zhuǎn) 化.當(dāng)經(jīng)過(guò)消化處理的菌體混合液經(jīng)過(guò)Miracloth過(guò)濾后,就可以去掉未被消化*的菌體和雜質(zhì),分離得 到的"裸露的"原生質(zhì)體就可以準(zhǔn)備進(jìn)行轉(zhuǎn)化或者電轉(zhuǎn)了.如果沒(méi)有這一步的分離,未*消化的菌體由于 生長(zhǎng)迅速,會(huì)嚴(yán)重干擾結(jié)果.
植物基因組純化相對(duì)比較麻煩一點(diǎn),市面上有不少試劑盒可供選擇,多數(shù)純化基因組DNA的試劑盒采用快速 離心方法,其純化產(chǎn)物大小僅為50kb左右.你可能沒(méi)有想到,一種改良的
神奇濾布Miracloth 快速純化方 法是另一種經(jīng)濟(jì)有效的選擇:通過(guò)液氮研磨得到的組織經(jīng)過(guò)裂解液處理,溫浴、醋酸鉀冰浴復(fù)性,用神奇濾 布Miracloth 過(guò)濾,得到的濾液可以直接用異丙醇沉淀.這個(gè)方法改良于玉米基因組純化,特別適合各種植 物組織DNA的純化.大的優(yōu)點(diǎn)是快速經(jīng)濟(jì)實(shí)用,不需要昂貴的試劑盒或者試劑,整個(gè)方法就像用試劑盒一 樣簡(jiǎn)單.
如果需要植物組織的高分子量基因組就不宜采用試劑盒. 神奇濾布Miracloth 是另外一個(gè)好選擇--植物 組織勻漿后直接用Miracloth過(guò)濾就可以得到含有細(xì)胞核的溶液,離心沉淀細(xì)胞核,后繼的高分子量基因組 抽提就簡(jiǎn)單易行了.此外,這個(gè)方法還可以用于制備研究轉(zhuǎn)錄因子所用的細(xì)胞核抽提物(Nucleic Extract),甚分離純化線粒體DNA、細(xì)胞膜等等.
其實(shí)
神奇濾布Miracloth 就是簡(jiǎn)單的一種微孔濾膜,比干酪布好用得多.只要你想得到,就有比產(chǎn)品說(shuō)明書 更廣泛而有趣的用途.比如有人用在植物真菌培養(yǎng),甚還有人用在抗體細(xì)胞培養(yǎng)中.聰明的你是不是也能 想到其他用途?只要有創(chuàng)意,這不起眼的小東西一樣可以在實(shí)驗(yàn)室中發(fā)揮重要作用喲.
