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科學(xué)渥曼青霉素, 轉(zhuǎn)危為益
  渥曼青霉素危害
  1.理化特性 異構(gòu)體多(達(dá)80多種)、耐熱、煮沸不能去除、可被紫外線光解、易在體內(nèi)富集、對(duì)肝有特殊的親和力.
  2.機(jī)制 (1)抑制磷酸酶 特一性抑制PP1和PP2A ① 使細(xì)胞發(fā)生凋亡樣變化 因:磷酸化與去磷酸化之間調(diào)節(jié)失衡,使蛋白過(guò)度磷酸化,引起細(xì)胞骨架損傷. 表現(xiàn)為:細(xì)胞膜皰、細(xì)胞萎縮、細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞器重排,核染色質(zhì)濃縮等. ② 可解抑制細(xì)胞增殖 使腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng). (2)引起脂質(zhì)過(guò)氧化 破壞細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)與功能. 渥曼青霉素
  (3)引起基因過(guò)度表達(dá) 與致癌有關(guān).
  3.中毒特點(diǎn): (1)肝臟毒性 (2)腎臟毒性 (3)遺傳毒性和促癌性① MCYST可明顯提高SHE細(xì)胞微核率的形成,并呈劑量-反應(yīng)關(guān)系. ② 不僅具有促癌性還具有致癌性
  (4)胚胎及發(fā)育毒性 與胚胎死亡率發(fā)育畸形率呈劑量-反應(yīng)關(guān)系. (5)其他毒性 ① 抑制免疫功能 ② 損傷神經(jīng)系統(tǒng) ③ 影響心功能
  渥曼青霉素使用濃度:
  Wortmannin的具體使用濃度請(qǐng)參考相關(guān)文獻(xiàn),并根據(jù)自身實(shí)驗(yàn)條件(如實(shí)驗(yàn)?zāi)康?細(xì)胞種類,培養(yǎng)特性等)進(jìn)行摸索和優(yōu)化.
  應(yīng)用實(shí)例(僅作參考):
  1)為檢測(cè)wortmannin對(duì)PI3激酶和PLK1的抑制作用,先用不同濃度的wortmannin(0.25-50nM)預(yù)處理可溶的Jurkat片段10min,然后用AX7503(50nM)處理60min,發(fā)現(xiàn)wortmannin抑制PI3激酶和PLK1的IC50值分別為5.8nM和2.1nM.為檢測(cè)wortmannin在體內(nèi)對(duì)PLK1的抑制作用,先用10μM nocodazole(抗腫瘤藥)處理Jurkat細(xì)胞15h(G2/M期阻滯),再用不同濃度的wortmannin(5,25,100,500nM)處理完整細(xì)胞30min(對(duì)照組用DMSO),發(fā)現(xiàn)PI3激酶和PLK1的活性都有降低,但是wortmannin對(duì)PI3激酶的抑制作用更.
  2)為檢測(cè)wortmannin對(duì)胰島素代謝活性的作用,1μM wortmannin與不同濃度的胰島素(0-100nM) 和1nM胰島素與不同濃度的wortmannin(0-1μM)分別孵育大鼠脂肪細(xì)胞20min,胰島素即使在高濃度(0.1μM)時(shí)其活性也可以被wortmannin抵消,而0.03μM wortmannin就可以抑制胰島素水平,在0.1μM時(shí)可以*抑制胰島素.為檢測(cè)wortmannin對(duì)脂肪細(xì)胞中PI 3激酶活性的抑制作用,用不同濃度的wortmannin(0,1,10,100,1000nM) 進(jìn)行處理,0.1μM wortmannin 可以*抑制PI-3激酶活性,wortmannin具有選擇性,在相同濃度時(shí)不會(huì)抑制PI-4激酶.
  用途及描述:生化試劑,生化實(shí)驗(yàn)研究,渥曼青霉素(Wortmannin)是有效的特異性的磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-K)抑制劑,IC50為2-4 nM.可抑制自噬體的形成,也有效抑制DNA-PK/ATM,IC50分別為16 nM 和150 nM.
  Wortmannin通過(guò)對(duì)PI3-K/Akt信號(hào)傳導(dǎo)途徑的抑制,能夠提高輻射或者去血清培養(yǎng)誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡效果,也能阻止細(xì)胞因子的抗細(xì)胞凋亡作用.渥曼青霉素對(duì)PI3-K的抑制作用也可以阻止由胰島素受體活化引起的許多短期代謝效應(yīng).Wortmannin無(wú)明顯的抗細(xì)菌作用,但具有很強(qiáng)的抑制真菌活性;

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