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簡(jiǎn)要介紹細(xì)胞凍存管的使用

 

凍存管又名冷凍管,是常用的實(shí)驗(yàn)耗材,多用于生物、醫(yī)藥、食品行業(yè)。凍存管一般用作實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞的低溫保藏。

凍存管介紹:

凍存管一般按容量劃分為0.5ml,1.0ml,1.5ml,1.8ml,2.0ml,4ml,5ml,7ml,10ml等。一般的凍存管不能進(jìn)入液氮里,只有特殊材料處理的才可以放入。同時(shí)凍存管還有雙層的和層的帶硅膠墊和沒(méi)有硅膠墊的等種種,還有無(wú)色和雜色及各種純色等不同。如果需要進(jìn)入液氮保藏的就要選擇密封的耐低溫的凍存管,還要認(rèn)清所購(gòu)買的凍存管是否是無(wú)菌以及無(wú)DNA,RNA。

凍存管的使用步驟

⑴ 從細(xì)菌純培養(yǎng)物中挑取新鮮培養(yǎng)物配成大約為3-4麥?zhǔn)媳葷岫鹊木鷳乙航臃N與菌種保存管中。

⑵ 擰緊保存管,來(lái)回顛倒4-5次使細(xì)菌乳化,不能旋搖。

⑶ 把保存管放入冰箱保存(-20℃--70℃)

凍存管的常見(jiàn)問(wèn)題:

1、問(wèn):Nunc凍存管可以滅菌嗎?

答:雖然凍存管使用聚乙烯材料制造,但是我們不推薦客戶滅菌。

2、問(wèn):凍存管內(nèi)旋蓋和外旋蓋有什么區(qū)別?

答:內(nèi)旋凍存管為氣相液氮?dú)庀嘀袃龃鏄悠范O(shè)計(jì),管口硅膠墊增強(qiáng)了凍存管的密封性;外旋凍存管為機(jī)械設(shè)備如冰箱中凍存樣品而設(shè)計(jì),外旋蓋的螺紋蓋可以降低處理樣品時(shí)的污染幾率。

3、問(wèn):Nunc的凍存管可以浸入液氮(液相)中凍存樣品嗎?

答:Nunc的內(nèi)旋凍存管可以在液氮中儲(chǔ)存,由于硅膠墊增強(qiáng)密封性。但超低溫度下,任何的密封材料都變得異常脆弱,理論上只要是機(jī)械密封就存在泄漏的危險(xiǎn),為了防止泄漏產(chǎn)品的危險(xiǎn),機(jī)械密封的凍存管必須密封在保護(hù)袋中。Nunc提供CryoFlex 密封管,熱密封的聚乙烯管專門為Nunc凍存管密封設(shè)計(jì)。將凍存管在液氮液相中凍存而沒(méi)有使用CryoFlex 密封管是十分危險(xiǎn)的,凍存管在液氮液相中凍存必須使用CryoFlex 密封管進(jìn)行熱密封。

4、問(wèn):當(dāng)凍存管儲(chǔ)存在液氮液相中而沒(méi)有使用CryoFlex Tubing 時(shí),如何正確的溶解復(fù)蘇細(xì)胞?

答:在整個(gè)操作過(guò)程中必須穿戴保護(hù)服,包括手套,臉罩等。

凍存管從液氮液相取出后必須在液氮?dú)庀嘀袃?chǔ)存24h,這樣可以使得液氮從凍存管中慢慢的蒸發(fā)和逃逸,從而降低凍存管中的壓力。等在液氮?dú)庀鄡?chǔ)存24h后,將凍存管放入水浴槽,同時(shí)用毛巾覆蓋,等熔融復(fù)蘇結(jié)束后轉(zhuǎn)移凍存物。

5、問(wèn):使用CryoFlex 密封管時(shí)需要熱密封,這會(huì)不會(huì)影響細(xì)胞活性?

答:將樣品加入凍存管以前需要將凍存管置于4℃ 冰浴槽。熱密封CryoFlex 密封管時(shí),凍存管內(nèi)溫度的升高水平不足以破壞細(xì)胞活性。這個(gè)階段需要加入凍存保護(hù)劑。

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