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標(biāo)本處理的幾個(gè)常見(jiàn)問(wèn)題

 組織標(biāo)本處理的步驟:取材、固定、脫水、包埋、切片、染色-HE

組織標(biāo)本的處理是簡(jiǎn)單基本的工作程序,看起來(lái)簡(jiǎn)單,認(rèn)真做起來(lái)會(huì)有很多問(wèn)題;

1、 取材的問(wèn)題:厚度:3mm,大小:2x1.5cm;過(guò)厚過(guò)大固定不透,脫水不透,影響切片染色。

2、 固定液:常用福爾馬林,如果標(biāo)本做免疫組化等其他實(shí)驗(yàn),用中性福爾馬林固定更好;

3、 固定液體量:要與標(biāo)本容積比:1:9;不可將同一動(dòng)物的內(nèi)臟放置在一個(gè)容器(常用的是試管),固定不透,夏天會(huì)發(fā)生腐敗細(xì)胞壞死自溶,不能區(qū)分是毒性作用所致還是溫度高所致。

4、 固定時(shí)間:小標(biāo)本4-6H,大標(biāo)本18-24H;固定時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng),經(jīng)常有實(shí)驗(yàn)室為了不同批動(dòng)物,一起做后續(xù)實(shí)驗(yàn),把先前的標(biāo)本放置在固定液中,以為固定了就行,做HE染色尚可,但會(huì)影響蛋白活性表達(dá),做免疫組化等其他實(shí)驗(yàn),將會(huì)影響結(jié)果;因此,不能過(guò)長(zhǎng)時(shí)間固定,對(duì)標(biāo)本脫水包埋處理,包埋成蠟塊后,保存時(shí)間可以很長(zhǎng)。

5、 特殊標(biāo)本處理:骨骼要脫鈣處理,動(dòng)物皮毛要去除,而且,要在活體時(shí)去毛。否則,動(dòng)物的毛發(fā)將影響后續(xù)染色觀察。

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