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索萊寶hanks液的作用及配置方法簡介

Hank's液是生物醫(yī)學(xué)試驗中常見的平衡鹽溶液(BSS)之一,簡稱HBSS。主要用于配制培養(yǎng)液,稀釋劑和細(xì)胞清洗液,而不能單獨作為細(xì)胞,組織培養(yǎng)液。D-Hank's與Hank's的一個主要區(qū)別在于前者不含有鈣和鎂離子,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。

Hanks液的配制

原液A

 

 

 

NaCl

160g

 

MgSO4·7H2O

2g

 

KCl

8g

 

Mg Cl2·6H2O

2g

 

CaCl2

2.8g

 

溶于1000ml雙蒸水

 

原液 B

 

 

(1)

Na2HPO4·12H2O

3.04g

 

KH2PO4

1.2g

 

葡萄糖

20.0g

 

溶于800ml雙蒸水

 

(2)

0.4%酚紅溶液:取酚紅0.4g,置玻璃研缽中,逐滴加入0.1N NaOH,并研磨,直*溶解,約加0.1N NaOH 10ml。將溶解的酚紅吸入100ml量瓶中,用雙蒸水洗下研缽中殘留酚紅液,并入量瓶中,后補加雙蒸水100ml。

 

將(1)液和(2)液混合,補加雙蒸水1000ml,即為原液B。

應(yīng)用液

               

 

 

原液A

1份

 

原液B

1份

 

雙蒸水

18份

 

混合后,分裝于200ml小瓶中,10磅高壓蒸氣滅菌15分鐘,臨用前用無菌的5.6% NaHCO3調(diào)pH7.2~7.6

注意事項:

1.BSS的pH值應(yīng)確定為7.2-7.4之間。

2.如配制的Hanks液高壓滅菌后液體變混,則可將100 mL的CaCl2與含有其他成分的液體分別裝瓶高壓滅菌之后,再在無菌條件下配制,定容。這樣可以避免高壓滅菌后液體變混。

3.胰酶受熱易失活,所以盡量避免盛夏配制,并且在配制過程中溫度應(yīng)始終保持在4℃左右。

4.胰酶研磨要充分,否則在過濾時會將較大的顆粒過濾掉,不能達到真正的濃度。

5.胰酶分裝時盡量分裝成多瓶,并遵守3次左右用完和只裝2/3體積的原則。因為冷凍保存時體積會膨脹,而多次使用同一瓶胰酶反復(fù)凍融會降低消化效果并可能造成污染。

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