丁香五月亚洲综合深深爱,亚洲av成人片色在线观看高潮,色综合AV综合无码综合网站,日本真人大尺度做爰

歡迎來北京索萊寶科技有限公司!我們將為您提供周到的服務(wù)!
產(chǎn)品分類Product categories
首頁 > 技術(shù)文章 > 免疫組化各步驟中應(yīng)注意事項
免疫組化各步驟中應(yīng)注意事項

免疫組化,是應(yīng)用免疫學基本原理即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理,通過化學反應(yīng)使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì)),對其進行定位、定性及定量的研究。在免疫組化試驗中應(yīng)該注意以下事項。

1 .固定 :好用4%的多聚甲醛固定液。對于冰凍切片,甲醛固定有時比冰凍丙酮好;但對于不同的組織和抗原 ,可選用不同的固定液。 有時候商品化的抗體會有比較適合而推薦的固定液,請于購置前注意說明書。

Bouin S固定液:飽和750ml,甲醛250ml,冰醋酸50ml,其對組織的穿透力較強,固定較好,結(jié)構(gòu)完整,但因偏酸,對抗原 有一定損害,且組織收縮明顯,不適于組織標本的長期保存。 PLP液:即高碘酸鈉-賴氨酸-多聚甲醛,適于固定石蠟切片。適于富含糖類組織,對超微結(jié)構(gòu)及許多抗原的抗原性保存較好。

2 .組織脫水,透明 :時間不能太長,否則在切片時容易碎片,切不完整。

3 .切片時展片: 有些組織在切片后難以在水中展開,這時可適當?shù)卦谒屑尤霂椎我掖肌?/p>

4 .烤片: 60℃ 30分鐘或37℃ 24小時,溫度太高或時間太長,抗原 容易丟失。

5 .蠟塊及切片的保存: 好在4℃保存

6 .脫片問題 : Poly-L-Lysine(多聚賴氨酸)為目前免疫組化 染色工作中常用的一種防脫片劑,6ml的多聚賴氨酸溶液可按1:10稀釋成60ml的工作液,適合于需要酶消化、微波、高溫高壓的防脫片處理。如不行,可用雙重處理(APES和Poly-L-Lysine)的切片。在以上兩種條件都行不通的情況下,可用如下方法:切片在脫蠟前,放在APES 1:50 丙酮溶液中浸泡3分鐘,晾干,即可進行下一步。

7 .滅活內(nèi)源性酶: HRP系統(tǒng):3%雙氧水滅活;AP系統(tǒng):3%HAc滅活。

8 .暴露抗原 : 對于石蠟切片的免疫組化實驗時,必須采用高溫加熱抗原修復,這將有助于暴露抗原決定簇,從而增加免疫組化染色的強度(不同抗體的佳修復液請參閱抗體說明書)。對于不同的組織,不同的抗原,不同的抗體,所采用的方法應(yīng)不一樣,可進行熱修復、胰酶消化、既不修復也不消化。膠原還可以用胃蛋白酶消化等。

9 .封閉: 在山羊血清封閉,非特異性染色仍然較強時,可延長封閉時間或用濃縮血清封閉

10 .抗體稀釋: 應(yīng)遵循“現(xiàn)用現(xiàn)配”的原則,對于PBS稀釋的抗體一定要當天使用。

11 .背景高: 在抗體濃度、反應(yīng)時間、反應(yīng)溫度等合適的條件下,如果背景依舊高,可采用含1‰ Tween20的PBS洗,特別是在顯色之前要多洗。

12 .返藍: 在蘇木素復染后,可用堿性緩沖液(如PBS)或Na2HPO4的飽和溶液返藍。

13 .顯色: 一定要在顯微鏡下觀察,注意控制背景。

14. 在整個操作過程中,切片千萬不能干燥,否則會有非特異性染色。

版權(quán)所有  ICP備案號: 管理登陸 技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)   總流量:941586  網(wǎng)站地圖

高清a片在线观看| 亚洲精品日本久久一区二区三区 | 国产乱子伦农村叉叉叉| 最近2019好看的中文字幕免费| 亚洲国产精品一区二区成人片国内 | 亚洲日本乱码在线观看| 精品视频一区二区三三区四区| 乱人伦人妻中文字幕无码| 欧美精品色婷婷五月综合| 国产免费一区二区三区免费视频| 亚洲精品无码高潮喷水a片软| 国产精品久久久久精品香蕉| 亚洲午夜精品A片久久| 国产成人AV三级在线观看| 国产综合久久久久久鬼色| 蜜臀AV无码一区二区三区| 国产精品亚洲AV电影在线观看| 国产av无码专区亚洲版综合| 国产av一区二区三区| 黑人粗进入欧美| 东北粗口国产床| 《年轻的护士3》在线观看视频| 成人免费区一区二区三区| 国产97在线 | 日韩| 亚洲精品国产精品乱码视色| 欧美乱大交XXXXX潮喷| 精品丰满人妻无套内射| 日韩精品无码一区二区三区免费 | 在线永久免费观看黄网站| 久久久久久人妻一区精品| 绿巨人WWW视频在线观看高清| 日韩精品a片一区二区三区| 中国少妇videos露脸hd| 亚洲色成人中文字幕网站| 亚洲一区二区三区高清在线观看| 国产97在线 | 日韩| 久久av高潮av无码av| 亚洲av成人无码精品网站老司机 | 国产三级无码内射在线看| あかねさす少女免费| 轻点好疼好大好爽视频|