丁香五月亚洲综合深深爱,亚洲av成人片色在线观看高潮,色综合AV综合无码综合网站,日本真人大尺度做爰

歡迎來北京索萊寶科技有限公司!我們將為您提供周到的服務(wù)!
產(chǎn)品分類Product categories
首頁 > 技術(shù)文章 > 【產(chǎn)品資訊】CCK-8細胞增殖及毒性檢測試劑盒說明書
【產(chǎn)品資訊】CCK-8細胞增殖及毒性檢測試劑盒說明書

CCK-8細胞增殖及毒性檢測試劑盒說明書

產(chǎn)品簡介:

Cell Counting Kit-8 簡稱CCK-8 試劑盒,為MTT 法的替代方法,是一種基于WST(水溶性四唑鹽,化學名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒??捎糜谒幬锖Y選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏等試驗。

 

使用說明: 

一、制作標準曲線(測定細胞具體數(shù)量時 (測定細胞具體數(shù)量時) 

1、先用細胞計數(shù)板計數(shù)所制備的細胞懸液中的細胞數(shù)量,然后接種細胞。 

2、按比例依次用培養(yǎng)基等比稀釋成一個細胞濃度梯度,一般要做 3-5 個細胞濃度梯度,每組 3-6 個復孔。 

3、接種后培養(yǎng)細胞貼壁,然后加 CCK-8 試劑培養(yǎng)一定時間后測定 OD 值,制作出一條以細胞數(shù)量為橫坐標(X 軸),OD 值為縱坐標(Y 軸)的標準曲線。根據(jù)此標準曲線可以測定出未知樣品的細胞數(shù)量(試用此標準曲線的前提是實驗的條件要一致,便于確定細胞的接種數(shù)量以及加入 CCK-8 后的培養(yǎng)時間。) 

二、細胞活性檢測 

1、在 96 孔板中接種細胞懸液(100µL/孔)。將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱中預培養(yǎng)(在 37℃,5% CO2 的條件下)。 

2、向每孔加入 10µL CCK-8 溶液(注意不要在孔中生成氣泡,它們會影響 OD 值的讀數(shù))。 

3、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育 1-4 小時。 

4、用酶標儀測定在 450nm 處的吸光度。 

5、如果暫時不測定 OD 值,打算以后測定的話,可以向每孔中加入 10µL 0.1M 的 HCl 或者 1%SDS(W/V)溶液,并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。在 24 小時內(nèi)吸光度不會發(fā)生變化。 

三、細胞增值-毒性檢測 

1、在 96 孔板中配置 100 µL 的細胞懸液。將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱預培養(yǎng) 24 小時(在 37 ℃,5% CO2 的條件下)。 

2、向培養(yǎng)板加入 10µL 不同濃度的待測物質(zhì)。在培養(yǎng)箱孵育一段適當?shù)臅r間(例如:6、12、24 或 48 小時)。 

3、向每孔加入 10 µL CCK-8 溶液(注意不要在孔中生成氣泡,它們會影響 OD 值的讀數(shù))。如果待測物質(zhì)有氧化性或還原性的話,可在加 CCK-8 之前更換新鮮培養(yǎng)基(除去培養(yǎng)基,并用培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加入新的培養(yǎng)基),去掉藥物影響。 

4、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育 1-4 小時。 

5、用酶標儀測定在 450 nm 處的吸光度。 

6、如果暫時不測定 OD 值,打算以后測定的話,可以向每孔中加入 10µL 0.1M 的 HCl 或者 1%SDS(W/V)溶液,并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。在 24 小時內(nèi)吸光度不會發(fā)生變化。 

 

 

活力計算:. 

細胞活力(%)=[A(加藥)-A(空白)]/[ A(0 加藥)-A(空白)]×100 

A(加藥):具有細胞、CCK-8 溶液和藥物溶液的孔的吸光度 

A(空白):具有培養(yǎng)基和 CCK-8 溶液而沒有細胞的孔的吸光度 

A(0 加藥):具有細胞、CCK-8 溶液而沒有藥物溶液的孔的吸光度

細胞活力:細胞增殖活力或細胞毒性活力 

注意事項: 

①建議先做幾個孔摸索接種細胞的數(shù)量和加入 CCK-8 試劑后的培養(yǎng)時間。 

②白細胞可能需要培養(yǎng)較長時間。 

③當使用標準 96 孔板時,貼壁細胞的小接種量少為 1 ,000 個/孔 (100 µL 培養(yǎng)基)。檢測白細胞時的靈敏度相對較低,因此推薦接種量不低于 2,500 個/孔 ( 100 µL 培養(yǎng)基)。如果要使用 24 孔板或 6 孔板實驗,請先計算每孔相應的接種量,并按照每孔培養(yǎng)基總體積的 10% 加入 CCK-8 溶液。 

④如果沒有 450nm 的濾光片,可以使用吸光度在 430-490 nm 之間的濾光片,但是 450nm 檢測靈敏度高。 

⑤培養(yǎng)基中酚紅的吸光度可以在計算時,通過扣除空白孔中本底的吸光度而消去,因此不會對檢測造成影響。 

CCK----8 法與其它檢測?法之間的mtt法較: 詳見說明書  

 

相關(guān)產(chǎn)品: 

M1020 MTT 細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒 

P1020 1×PBS,PH7.2-7.4,0.01M,細胞培養(yǎng)級 

H1020 Hanks,含鈣鎂,含酚紅(HBSS) 

H2045 EBSS(不含鈣鎂,不含酚紅 ) 

12100 DMEM(H) 

S9000 特級胎牛血清 

P1400 青鏈霉素混合液(100×) 

版權(quán)所有  ICP備案號: 管理登陸 技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)   總流量:941586  網(wǎng)站地圖

国产v综合v亚洲欧美久久| 亚洲国产精品精华液| 国产熟女乱子视频正在播放| 无码国产精成人午夜视频不卡| 日本韩国三级观看| 人妻少妇精品视频一区二区三区 | 4399在线观看韩国电影| 国产中年熟女高潮大集合| 国产成人精品一区二区三区影院| 小嫩妇好紧好爽再快视频| 在线观看做爰免费视频| av无码天堂一区二区三区| 可以免费看美女隐私的app| 7777色鬼xxxx欧美色妇| 无码人妻一区二区三区免费看| 国产色婷亚洲99精品av在| 成人AV片无码免费网站| 天堂网在线观看| 女人被强╳到高潮喷水在线观看 | 好先生在线观看免费完整版 | 成人免费a级毛片无码片| 亚洲精品久久久久av无码| 欧美黑人巨大精品videos| 中国极品少妇xxxxx| 亚洲乱亚洲乱妇50p| 露娜拿的金箍棒玩自己视频| 人妻少妇精品视频三区二区一区| 小少妇性开放xxxxxhd| 最近2019中文字幕在线| 亚洲欧美精品无码一区二区三区 | 国产东北露脸熟妇| 人人妻人人爽人人澡欧美一区| 国产亚洲精品久久久久久久软件 | 欧美人与禽ZOZO性伦交| 久久www免费人成一看片| 成在人线无码AⅤ免费视频| 亚洲熟妇av一区| 18禁裸男晨勃露j毛免费观看| 花季传媒免费观看| 国产精品久久毛片a片| 13一14XXX欧美|