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更新時(shí)間：2015-03-10
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Western Blot膜再生液說(shuō)明書(shū)
貨號(hào)：SW3020
規(guī)格：100 ml / 500 ml
保存：室溫保存，一年有效。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
使用膜再生液可以對(duì)同一張膜進(jìn)行多次Western Blot檢測(cè)。在室溫條件下，將用過(guò)的膜浸泡在膜再生液10-60分鐘，可在不影響抗原蛋白的情況下清除膜上結(jié)合的抗體。隨后，可以使用不同的抗體進(jìn)行下一輪Western Blot實(shí)驗(yàn)。適宜從少量樣品多次檢測(cè)不同蛋白質(zhì)。即使樣品量并不匱乏，采用這一策略多次檢測(cè)同一張膜上的蛋白，能省去給藥處理、蛋白電泳和膜轉(zhuǎn)移等耗費(fèi)性步驟。而且可以消除重新上樣而帶來(lái)的誤差，使可比性更強(qiáng)。 Western Blot膜再生液特點(diǎn)是：無(wú)毒無(wú)味無(wú)害，室溫下使用，室溫下保存；可對(duì)同一張膜進(jìn)行5次以上的Western Blot檢測(cè)。適用：清除硝酸纖維素膜或PVDF膜上結(jié)合的抗體，不影響抗原蛋白。
使用方法： 1. 將膜充分浸泡于適當(dāng)體積的再生液中，室溫洗脫10-20分鐘，時(shí)間長(zhǎng)短應(yīng)該參考注意事項(xiàng)進(jìn)行優(yōu)化，洗脫某些抗體需較長(zhǎng)時(shí)間，更有長(zhǎng)達(dá)60分鐘之久。 2. 取出膜，用洗滌液（如TBST等）漂洗兩次。 3. 此時(shí)膜上抗體已除去，可再加入另一種抗體進(jìn)行檢測(cè)。
注意事項(xiàng)： 1. 膜再生液實(shí)質(zhì)是在不影響膜上結(jié)合的抗原的條件下將抗體洗脫下來(lái)，實(shí)際操作中，膜類型、抗體類型、濃度及抗原特性都影響洗脫難易度。 2. 用ECL顯色后，再生液洗脫幾分鐘后，可再次加入ECL顯色液顯影，如膠片上顯示條帶，表明抗體未除凈，須進(jìn)一步在再生液中浸泡，膠片上無(wú)顯色。 3. 使用脫脂奶粉封閉的膜要比使用BSA封閉的膜更容易再生。 4. 盡量避免讓膜干燥。
相關(guān)產(chǎn)品：
PR1800 Western blotting蛋白MARKER
PE0010 ECL Plus熒光檢測(cè)試劑(ECL超敏發(fā)光液)
A1010 30%丙烯酰胺 (29:1)
P1015 4×蛋白上樣緩沖液（含DTT）
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