本期主題 什么是吸光值?
A260、A280和A230是紫外分光光度計在核酸濃度和純度檢測中常用的波長。通過這些波長的吸光值,可以計算出A260/A280和A260/A230比值,用于評估DNA或RNA的純度。在質(zhì)粒DNA提取中,比值異常通常反映樣本被特定雜質(zhì)污染。
下面先對質(zhì)粒DNA濃度各數(shù)值代表的含義進行下詳細的介紹。
一、各吸光值含義
二、理想的比值范圍
對于更精確的定量,建議使用Qubit熒光定量或RiboGreen定量方法。
三、質(zhì)粒DNA比值異常原因分析
因此,對于質(zhì)粒DNA而言,吸光值超出正常范圍時,實際濃度便會有不準(zhǔn)確性,建議若有電泳結(jié)果,需要將NanoDrop測定的比值結(jié)合瓊脂糖凝膠電泳的亮度一起判斷質(zhì)粒質(zhì)量。
四、濃度虛高或偏低
● 質(zhì)粒構(gòu)型(如超螺旋、線性、開環(huán))不同,在瓊脂糖凝膠上的遷移速度不同,導(dǎo)致亮度與實際濃度不符。
● RNA殘留(未充分降解的小RNA片段)污染,殘留的RNA會在電泳上最下面看到有亮帶殘留,干擾對質(zhì)粒濃度的判斷。
● 蛋白質(zhì)或酚類物質(zhì)污染,紫外分光光度計測得的A260值偏高,導(dǎo)致質(zhì)粒濃度虛高。
● 斷裂的DNA片段,導(dǎo)致電泳亮度降低,但濃度測定仍顯示較高值。
五、索萊寶質(zhì)粒提取試劑盒:
提取純化質(zhì)粒DNA的得力助手,真實!
質(zhì)粒是一種小型、環(huán)狀的DNA分子,存在于細菌等微生物中。它們獨立于細菌的染色體DNA存在,能夠自主復(fù)制,并且可以攜帶各種基因。它們是科學(xué)家們手中的“基因載體",能夠幫助我們實現(xiàn)基因的轉(zhuǎn)移、表達和調(diào)控。在分子生物學(xué)實驗中,質(zhì)粒提取是一項基礎(chǔ)且關(guān)鍵的操作。一個優(yōu)質(zhì)的質(zhì)粒提取試劑盒,能夠幫助科研人員快速、高效地獲取高質(zhì)量的質(zhì)粒DNA。
主要的應(yīng)用領(lǐng)域
基因克隆:獲取大量目標(biāo)基因;基因庫構(gòu)建;基因序列分析
基因表達:蛋白質(zhì)生產(chǎn);功能研究
遺傳工程:基因編輯;基因治療;轉(zhuǎn)基因生物
基因調(diào)控研究:啟動子分析;轉(zhuǎn)錄因子研究;信號通路研究
生物制藥:藥物開發(fā);疫苗制備;基因治療藥物
教育和科研工具:教學(xué)實驗;科研工具
顯著優(yōu)勢
操作簡便,省時高效,安全環(huán)保
流程標(biāo)準(zhǔn)化:無需有毒試劑,避免傳統(tǒng)方法中苯-酚、氯-仿等危險化學(xué)品的使用,只需離心即可完成。
快速提取:通常30-60分鐘即可獲得高純度質(zhì)粒DNA,適合高通量實驗需求。
高純度、高得率
采用柱式純化技術(shù),結(jié)合裂解和吸附配方,有效去除雜質(zhì)(如RNA、蛋白質(zhì)、基因組DNA)。
A260/A280=1.8-2.0,A260/A230=2.0-2.5,確保質(zhì)粒提取的高濃度。
兼容性強,適用范圍廣
適用于多種大腸桿菌菌株,如DH5α等,對不同質(zhì)粒均可輕松提取。
不同規(guī)模需求:從微量(1-5mL)到大量(100mL)培養(yǎng)物均可匹配。
下游應(yīng)用廣:可直接用于PCR、酶切、轉(zhuǎn)化等高靈敏度實驗。
靈活選擇(不同級別試劑盒)
普通級:常規(guī)克隆、篩選
去內(nèi)毒素級:細胞轉(zhuǎn)染、基因治療
索萊寶質(zhì)粒提取試劑盒產(chǎn)品
貨號 | 名稱 |
D1100 | 質(zhì)粒小量提取試劑盒 |
D1110 | 質(zhì)粒大量提取試劑盒 |
D1120 | 革蘭氏陽性菌質(zhì)粒小量提取試劑盒 |
D1130 | 革蘭氏陽性菌質(zhì)粒大量提取試劑盒 |
D1140 | 去內(nèi)毒素質(zhì)粒小量提取試劑盒 |
D1150 | 去內(nèi)毒素質(zhì)粒大量提取試劑盒 |
D1160 | 酵母質(zhì)粒小量提取試劑盒 |
DM1100 | 質(zhì)粒小量提取試劑盒(磁珠法) |
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