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玻璃紙透析培養(yǎng)觀察法

⑴ 玻璃紙的選擇與處理:要選擇能夠允許營養(yǎng)物質(zhì)透過的玻璃紙。也可收集商品包裝用的玻璃紙,加水煮沸,然后用冷水沖洗。經(jīng)此處理后的玻璃紙若變硬,必定是不可用的,只有那些軟的可用。將那些可用的玻璃紙剪成適當(dāng)大小,用水浸濕后,夾于舊報(bào)紙中,然后一起放入平皿內(nèi)121℃滅菌30min備用。
⑵ 菌種的培養(yǎng):按無菌操作法,倒平板,冷凝后用滅菌的鑷子夾取無菌玻璃紙貼附于平板上,再用接種環(huán)沾取少許霉菌孢子,在玻璃紙上方輕輕抖落于紙上。然后將平板置28~30℃下培養(yǎng)3~5天,曲霉和青霉即可在玻璃紙上長出單個(gè)菌落(根霉的氣生性強(qiáng),形成的菌落鋪滿整個(gè)平板)。
⑶ 制片與觀察:剪取用玻璃紙透析法培養(yǎng)3~4d 后長有菌絲和孢子的玻璃紙一小塊,先放在50%乙醇中浸一下,洗掉脫落下來的孢子,并趕走菌體上的氣泡,然后正面向上貼附于干凈載玻片上,滴加1~2滴乳酸石炭酸棉藍(lán)液,小心地蓋上蓋玻片,注意不要產(chǎn)生氣泡,不要移動(dòng)蓋玻片,以免搞亂菌絲。
標(biāo)本片制好后,先用低倍鏡觀察,必要時(shí)再換高倍鏡。注意觀察菌絲有無隔膜,有無假根、足細(xì)胞等特殊形態(tài)的菌絲。注意其無性繁殖器官的形狀和構(gòu)造,孢子著生的方式和孢子的形態(tài)、大小等。

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