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使用HRP標(biāo)記鏈霉親和素經(jīng)常遇到的問題有哪些?
  鏈霉親和素是與親和素具有相似性質(zhì)的一種蛋白質(zhì),都具有與生物素特異結(jié)合的能力,結(jié)合常數(shù)高達(dá)10(15)M.同時(shí),由于鏈霉親和素等電點(diǎn)比親和素低,且不含糖基鏈,故在檢測(cè)中的靈敏度和特異性都高于親和素,建立在此基礎(chǔ)上的生物素-鏈霉親和素系統(tǒng)的應(yīng)用比生物素-親和素系統(tǒng)有更大優(yōu)勢(shì)。
  HRP標(biāo)記鏈霉親和素是指用HRP酶來標(biāo)記特定鏈霉親和素分子,這些親和素分子通過HRP酶的氧化反應(yīng)形成一定的物質(zhì)可能具有磁性,可用于鑒別和分離特定的抗原。它由驅(qū)動(dòng)素-過氧化物酶結(jié)合到抗體上,用來檢測(cè)抗原的存在。它主要用于免疫細(xì)胞化學(xué)和免疫組織化學(xué)。
  使用HRP標(biāo)記鏈霉親和素的常見問題:
  1. 包被抗體或抗原不適,易產(chǎn)生陽性值較小,或產(chǎn)生變異,即跳管現(xiàn)象。
  2. 用抗血清不純化,或純化程度太低的抗體包被,則陽性值較小,或沒有陽性梯度。
  3. 封閉不好或標(biāo)記物過濃可產(chǎn)生對(duì)照值較高。

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