酶聯(lián)免疫系統(tǒng)是用在elisa試劑盒上的，不過在技術(shù)還是缺乏標(biāo)準(zhǔn)化的，因此，我國(guó)有的部分就用的是標(biāo)準(zhǔn)血清，大家在收集血清標(biāo)本的時(shí)候得都當(dāng)心，而且放冰箱保持的時(shí)間不易過久的。在酶聯(lián)免疫測(cè)定尤其是直接elisa試劑盒中，試劑的特異性取決于。標(biāo)本凝聚不全時(shí)，血清中會(huì)殘留部分纖維蛋白原，也易形成假陽性。檢修標(biāo)本中含有酶符號(hào)物的攪擾物，內(nèi)源性攪擾物類風(fēng)濕因子(RF)、黃疸等，類風(fēng)濕因子是可作用于多種動(dòng)物以及人IgGFc段的自身抗體，大都為IgM類，能充任抗原成分與固相及酶標(biāo)抗體反響，然后出現(xiàn)非特異性顯色。
elisa試劑盒如在冰箱中保存過久，其間的IgG可發(fā)作聚合，在直接法ELISA試劑盒中可使本底加深。但因?yàn)槭芊椒▽W(xué)及技能條件的約束，在酶聯(lián)吸附測(cè)定中有時(shí)不可避免的會(huì)泛起一定的非特異性，但我們能夠經(jīng)過以上措施把非特異性顯色降至zui低限底，然后前進(jìn)檢測(cè)的特異性，并得到更正確、可靠的試驗(yàn)成果。
一、試劑盒的試劑，超卓的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測(cè)效果準(zhǔn)確可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的構(gòu)成不同而有所差異，國(guó)內(nèi)醫(yī)學(xué)查驗(yàn)一般均用板式點(diǎn)。本文將敘說試劑盒各個(gè)操作進(jìn)程的留心要害，珠式、管式及磁性球ELSIA，國(guó)外試劑均與特別儀器協(xié)作運(yùn)用，嚴(yán)峻遵照規(guī)矩操作，必能得出準(zhǔn)確的效果。
二、可用作試劑盒的標(biāo)本十分廣泛，體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測(cè)定其間某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定(如血清、尿液)，有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均對(duì)等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑，而血清標(biāo)本只需待血清天然凝聚、縮短后即可取得。除特別狀況外，在醫(yī)學(xué)查驗(yàn)中均以血清作為檢測(cè)標(biāo)本。在ELISA中血漿和血清可對(duì)等運(yùn)用。
三、試劑盒血清標(biāo)本可按常規(guī)辦法搜集，應(yīng)留心避免溶血，紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP為符號(hào)的ELISA測(cè)定中，溶血標(biāo)本可能會(huì)添加非特異性顯色。
四、血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會(huì)發(fā)生假陽性反應(yīng)。試劑盒如在冰箱中保存過久，其間的可發(fā)生聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。
五、一般說來，在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃，逾越一周測(cè)定的需低溫冰存。凍住血清融解后，蛋白質(zhì)部分濃縮，散布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛倒混和，不要在混勻器上劇烈振動(dòng)?；鞚峄蛴谐练e的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾，澄清后再檢測(cè)。重復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)下跌，所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保存作屢次檢測(cè)，宜少數(shù)分裝冰存。保存血清自搜集時(shí)就應(yīng)留心無菌操作，也可參與恰當(dāng)防腐劑。
