很多小伙伴在準(zhǔn)備采血做ELISA的時(shí)候都會(huì)有這樣的疑問—我檢測的指標(biāo)是用血清，還是血漿好？今天小編就來帶大家了解一下ELISA檢測使用血清和血漿的差異。
血清和血漿的區(qū)別
人的血液由血漿和血細(xì)胞組成。血漿的成分主要包含水、蛋白質(zhì)、葡萄糖、無機(jī)鹽。血細(xì)胞包含紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板。
1
血液中如果加入抗凝劑，所獲得的不含血細(xì)胞成分的液體，即血漿。血漿中不含一些凝血過程中血小板釋放的物質(zhì)。
2
若血液中不加抗凝劑，則血小板釋放的凝血物質(zhì)會(huì)和血漿中的凝血素以及纖維蛋白原結(jié)合形成纖維蛋白，纖維蛋白很快地凝固形成凝血kuai，經(jīng)血凝塊聚縮釋出的液體，即血清。血清中不含纖維蛋白原和某些凝血因子、無參與凝血的血漿蛋白。
在檢測中樣本的選擇
1、全血多用于血細(xì)胞、血常規(guī)、血沉等方面的檢測；
2、血清多用于血液生化、免疫等方面的檢測；
3、血漿多用于凝血等方面的檢測；
4、血清的凝血過程可能會(huì)與藥物產(chǎn)生吸附作用，從而減少血清的含量，造成實(shí)驗(yàn)中的誤差；
5、血漿中含有抗凝物質(zhì)（EDTA或肝素），可能干擾化合物的結(jié)合或檢測，如果要收集血漿，抗凝劑的種類應(yīng)根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)行選擇。
血清&血漿樣本的制備方法
血清樣本的制備
1
使用無熱原、無內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液樣本，將試管或離心管在室溫下放置1小時(shí)或2~8℃過夜，分離出血清；
2
2~8℃條件下，以1000×g離心20分鐘，小心收集上清液（血清）。
血漿樣本的制備
1
使用含抗凝劑的采血管或離心管采集血液樣本；
2
采集后30分鐘內(nèi)，2-8℃條件下，以1000×g離心15分鐘，小心收集上清液（血漿）；
3
常見的抗凝劑包括：EDTA鈉鹽，肝素鈉，枸櫞酸鈉等，ELISA實(shí)驗(yàn)中，通常推薦EDTA鹽（EDTA二鈉鹽或EDTA二鉀鹽）作為抗凝劑。
檢測前請(qǐng)仔細(xì)閱讀ELISA試劑盒說明書，查看該試劑盒針對(duì)抗凝劑是否有特殊要求。
注意事項(xiàng)
※在收集血液樣本的過程中應(yīng)避免溶血，因?yàn)榧t細(xì)胞在溶解時(shí)會(huì)釋放具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，這種情況下，ELISA實(shí)驗(yàn)中將會(huì)出現(xiàn)非特異性顯色反應(yīng)，導(dǎo)致檢測結(jié)果不準(zhǔn)確。另外，樣本還應(yīng)避免細(xì)菌污染，因?yàn)榧?xì)菌可能含有內(nèi)源性HRP，也會(huì)導(dǎo)致檢測結(jié)果不準(zhǔn)確。
※所有血清、血漿樣本收集完成后，應(yīng)及時(shí)分裝放在-20℃或-70℃條件下保存，避免反復(fù)凍融。如果在24小時(shí)內(nèi)檢測，樣本可以存放在2~8℃。在分析前，冷凍樣本應(yīng)該緩慢的恢復(fù)至室溫，輕柔地混勻。如果保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。
以上就是小編分享給大家關(guān)于ELISA檢測是用血清樣本還是血漿樣本的實(shí)驗(yàn)干貨，祝各位小伙伴實(shí)驗(yàn)順利！
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