丙酮酸測定試劑盒的測定步驟：

1、 分光光度計預熱30min 以上，調節(jié)波長至520nm，蒸餾水調零。

2、取300μL 樣本+100μL 試劑一于1.5mL EP 管中，混勻，靜置2min，加入500μL 試劑二，混勻，于520nm波長處測定管吸光值A。

丙酮酸的計算方法：

1、標準條件下測定回歸方程為y = 0.0466x + 0.0675； x 為丙酮酸含量（µg/mL），y 為吸光值。

2、按照血清（漿）體積計算

丙酮酸含量（μg/mL）= [(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷（V3×V1÷V2）=214.6×(A-0.0675)

3、按照蛋白濃度計算

丙酮酸含量（μg/mg prot）=[(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷(V1×Cpr)=21.46×(A-0.0675) ÷Cpr

4、按照樣品質量計算

丙酮酸含量（µg/g 鮮重）= [(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷(W ×V1÷V2）=21.46×(A-0.0675) ÷W

5、按照細菌或細胞密度計算

丙酮酸含量（μg/104 cell）＝[(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷（500×V1÷V2）=0.043×(A-0.0675)

V1：加入反應體系中樣本體積，0.3mL；V2：加入提取液體積，1 mL；V3：加入血清（漿）體積，0.1 mL；

Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本質量，g；500：細菌或細胞總數，500 萬。