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談?wù)凩B培養(yǎng)基滅菌前后pH值差異的原因
  LB培養(yǎng)基是微生物試驗(yàn)的基礎(chǔ),直接影響微生物的試驗(yàn)結(jié)果,而pH值又是培養(yǎng)基的重要監(jiān)控項(xiàng)目。這是因?yàn)槲⑸锏纳L不僅依賴豐富的營養(yǎng),還需要一個(gè)適宜的pH環(huán)境,只有在適宜的pH環(huán)境下微生物才能正常生長繁殖或體現(xiàn)其生物特性,因此培養(yǎng)基pH值是否符合要求直接影響微生物檢驗(yàn)結(jié)果。在培養(yǎng)基配制過程中,滅菌過程對培養(yǎng)基pH值影響尤為重要。我們常??梢园l(fā)現(xiàn),培養(yǎng)基在滅菌前后pH值有差異,一般滅菌后pH值都會有所下降,這是為什么呢?本文我們將和大家簡單聊一下滅菌前后pH值變化的那些事。
 
  一、滅菌的時(shí)間和溫度:
 
  在高壓濕熱滅菌時(shí),長時(shí)間的高溫會對培養(yǎng)基產(chǎn)生很多不利的影響,例如會導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)分解、營養(yǎng)成分改變以及pH值變化,進(jìn)而影響微生物生長。同時(shí)還可能引起培養(yǎng)基顏色變化、透明度降低、瓊脂凝膠強(qiáng)度變化等。培養(yǎng)基在滅菌過程中,滅菌的溫度和時(shí)間,高壓滅菌器升溫、降溫的速率,滅菌容器的容積和裝載方式等因素都對培養(yǎng)基的滅菌有著重要影響。
 
  二、培養(yǎng)基的成分:
 
  在培養(yǎng)基的配制過程中我們會發(fā)現(xiàn),同樣的滅菌溫度和時(shí)間,同樣的體積和裝量的不同培養(yǎng)基,在滅菌后pH值變化不同,有的培養(yǎng)基pH值變化較多,有的培養(yǎng)基pH值變化較少。這是因?yàn)椴煌囵B(yǎng)基的成分不盡相同,而不同的成分在滅菌過程中對培養(yǎng)基ph值有著不同的影響。糖類和蛋白胨是培養(yǎng)基中最常見的兩種重要成分,那么這兩種成分分別對培養(yǎng)基滅菌后pH值有著什么樣的影響呢?
 
  糖類,例如葡萄糖、乳糖等作為碳源被微生物所利用。糖類在高溫條件下會產(chǎn)生有機(jī)酸使培養(yǎng)基pH值下降。一般情況下,培養(yǎng)基含糖量越高,滅菌后pH值下降越多。如果過度滅菌pH值變化會更加明顯。同時(shí),糖類在高溫滅菌時(shí)容易焦化,使培養(yǎng)基顏色加深。
 
  蛋白胨一般作為培養(yǎng)基氮源,為微生物的生長提供營養(yǎng)物質(zhì)。蛋白胨在培養(yǎng)基滅菌時(shí)還能對培養(yǎng)基的pH值變化起到一定的緩沖作用。一般含胨量高的培養(yǎng)基,滅菌前后pH值變化相對較小。
 
  另外,若培養(yǎng)基成分中含有緩沖劑,如磷酸氫二鉀等,也可以減少培養(yǎng)基滅菌前后pH值的變化。
 
  三、測量pH值時(shí)的溫度:
 
  同一培養(yǎng)基在不同溫度下測得的pH值也會有一定差異,一般培養(yǎng)基的pH值會隨著測量時(shí)溫度的升高而降低。培養(yǎng)基滅菌之后未*冷卻時(shí),測量的pH值一般會偏低,這是由于溫度升高時(shí)溶液中的游離離子數(shù)增多,測得的pH值較低;反之,當(dāng)溫度降低時(shí)游離離子數(shù)減少,測得的pH值較高。通常我們在測定培養(yǎng)基pH值時(shí),溫度控制在25℃左右。

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