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渥曼青霉素試劑應(yīng)用案例
渥曼青霉素試劑應(yīng)用案例
  應(yīng)用實(shí)例(僅作參考):
  為檢測(cè)wortmannin對(duì)PI3激酶和PLK1的抑制作用,先用不同濃度的wortmannin(0.25-50nM)預(yù)處理可溶的Jurkat片段10min,然后用AX7503(50nM)處理60min,發(fā)現(xiàn)wortmannin抑制PI3激酶和PLK1的IC50值分別為5.8nM和2.1nM。為檢測(cè)wortmannin在體內(nèi)對(duì)PLK1的抑制作用,先用10μM nocodazole(抗腫瘤藥)處理Jurkat細(xì)胞15h(G2/M期阻滯),再用不同濃度的wortmannin(5,25,100,500nM)處理完整細(xì)胞30min(對(duì)照組用DMSO),發(fā)現(xiàn)PI3激酶和PLK1的活性都有降低,但是wortmannin對(duì)PI3激酶的抑制作用更。
  為檢測(cè)wortmannin對(duì)胰島素代謝活性的作用,1μM wortmannin與不同濃度的胰島素(0-100nM) 和1nM胰島素與不同濃度的wortmannin(0-1μM)分別孵育大鼠脂肪細(xì)胞20min,胰島素即使在高濃度(0.1μM)時(shí)其活性也可以被wortmannin抵消,而0.03μM wortmannin就可以抑制胰島素水平,在0.1μM時(shí)可以*抑制胰島素。為檢測(cè)wortmannin對(duì)脂肪細(xì)胞中PI 3激酶活性的抑制作用,用不同濃度的wortmannin(0,1,10,100,1000nM) 進(jìn)行處理,0.1μM wortmannin 可以*抑制PI-3激酶活性,wortmannin具有選擇性,在相同濃度時(shí)不會(huì)抑制PI-4激酶。
  渥曼青霉素試劑是一種,不可逆的PI3K特異性抑制劑(IC50=2-5 nM),分離自絲狀真菌Penicillium funiculosum,抑制活性高于另外一種常用的PI3K抑制劑LY294002。

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