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免疫組化各步驟中應(yīng)注意事項(xiàng)
2015-12-30
免疫組化,是應(yīng)用免疫學(xué)基本原理即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理,通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì)),對(duì)其進(jìn)行定位、定性及定量的研究。在免疫組化試驗(yàn)中應(yīng)該注意以下事項(xiàng)。1.固定:好用4%的多聚甲醛固定液。對(duì)于冰凍切片,甲醛固定有時(shí)比冰凍丙酮好;但對(duì)于不同的組織和抗原,可選用不同的固定液。有時(shí)候商品化的抗體會(huì)有比較適合而推薦的固定液,請(qǐng)于購置前注意說明書。BouinS固定液:飽和750ml,甲醛250ml,冰醋酸50...
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分類介紹蛋白marker的原理及作用
2015-12-28
蛋白質(zhì)marker指的是做western時(shí),用來參照的標(biāo)準(zhǔn)蛋白,顯示蛋白大小,用以與自己蛋白進(jìn)行對(duì)比,估計(jì)蛋白大小。在免疫印跡(Westernblot)試驗(yàn)中,分子量Marker雖不起眼,但意義重大,是陽性對(duì)照,是大小的標(biāo)準(zhǔn),是必須的。蛋白marker的分類:一.未染色(premixed)蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)未染色的蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)是簡(jiǎn)單,也是準(zhǔn)確的一種。由于沒有附帶染料分子或者是標(biāo)記分子,所示大小正好是蛋白原本的大小,是判斷蛋白大小必須的?,F(xiàn)在的marker多數(shù)都選用預(yù)混和的Mar...
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【產(chǎn)品資訊】CCK-8細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)試劑盒說明書
2015-12-28
CCK-8細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)試劑盒說明書產(chǎn)品簡(jiǎn)介:CellCountingKit-8簡(jiǎn)稱CCK-8試劑盒,為MTT法的替代方法,是一種基于WST(水溶性四唑鹽,化學(xué)名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)的廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測(cè)試劑盒??捎糜谒幬锖Y選、細(xì)胞增殖測(cè)定、細(xì)胞毒性測(cè)定、腫瘤藥敏等試驗(yàn)。使用說明:一、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(測(cè)定細(xì)胞具體數(shù)量時(shí)(測(cè)定細(xì)胞具體數(shù)量時(shí))1、先用細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)所制備的細(xì)...
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胰蛋白酶消化液的作用用途及使用方法
2015-09-29
胰蛋白酶消化液的作用用途及使用方法胰蛋白酶消化液為蛋白酶的一種,EC3.4.4.4,是從牛、羊、豬的胰臟提取的一種絲氨酸蛋白水解酶。在脊椎動(dòng)物中,作為消化酶而起作用。在胰臟是作為酶的前體胰蛋白酶原而被合成的。作為胰液的成分而分泌,受腸激酶,或胰蛋白酶的限制分解成為活化胰蛋白酶,是肽鏈內(nèi)切酶,它能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基側(cè)切斷。它不僅起消化酶的作用,而且還能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前體,起活化作用。是特異性強(qiáng)的蛋白酶,在決定蛋白質(zhì)的氨基酸排列...
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衣霉素的作用機(jī)理及說明
2015-09-08
衣霉素的作用機(jī)理及說明衣霉素tunicamycin,為放線菌Streptomyceslysosuperficus產(chǎn)生的核苷酸抗生素??梢种凭哂斜荒ぃ╡nvelope,含糖蛋白)的病毒的繁殖。衣霉素作用機(jī)理是抑制合成糖蛋白糖鏈必需的擬脂(多萜醇,dolichol)中間產(chǎn)物的生成。比如:在天冬酰胺的糖蛋白糖鏈的生物合成中,抑制N-乙酰葡萄糖胺-1-磷酸轉(zhuǎn)移到脂質(zhì)載體上。。又因?yàn)樗梢种圃诤铣杉?xì)菌細(xì)胞壁的肽聚糖或胞壁酸中必需的擬脂(細(xì)菌萜醇,多聚萜醇)中間產(chǎn)物的形成,所以顯示對(duì)革蘭...
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【產(chǎn)品資訊】細(xì)胞凍存液的原理及配制方法
2015-08-31
【產(chǎn)品資訊】細(xì)胞凍存液的原理及配制方法細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融,實(shí)驗(yàn)證明這樣可以大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法,這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對(duì)細(xì)胞造成損傷。細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)、引種、保種和保證實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行的重要...
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【產(chǎn)品資訊】BCA 蛋白濃度測(cè)定試劑盒的原理及特點(diǎn)
2015-08-31
【產(chǎn)品資訊】BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒檢測(cè)蛋白濃度的原理及特點(diǎn)堿性條件下,蛋白將Cu2+還原為Cu+,Cu+與BCA試劑形成紫藍(lán)色的絡(luò)合物,測(cè)定其在562nm處的吸收值,并與標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)比,即可計(jì)算待測(cè)蛋白的濃度。常用濃度的去垢劑SDS,TritonX-100,Tween不影響檢測(cè)結(jié)果,但受螯合劑(EDTA,EGTA)、還原劑(DTT,巰基乙醇)和脂類的影響。實(shí)驗(yàn)中,若發(fā)現(xiàn)樣品稀釋液或裂解液本身背景值較高,可試用考馬斯亮藍(lán)(Bradford)蛋白濃度測(cè)定試劑盒。BCA法蛋白濃度檢...
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【產(chǎn)品資訊】雷帕霉素的免疫抑制作用
2015-08-31
【產(chǎn)品資訊】雷帕霉素的免疫抑制作用雷帕霉素雷帕霉素(Rapamycin,RAPA,RPM),又名Sirolimus,分子式為C51H79NO13,分子量為914.2,為白色固體結(jié)晶,熔點(diǎn)為183-185℃,親脂性,溶解于有機(jī)溶劑,極微溶于水,幾乎不溶于乙mi,屬大環(huán)內(nèi)酯類抗生素。起初RAPA被研究作為低毒性的抗真菌藥物,1977年發(fā)現(xiàn)RAPA具有免疫抑制作用;1989年開始把RAPA作為治療器官移植的排斥反應(yīng)的新藥進(jìn)行試用。雷帕霉素(RAPA)通過不同的細(xì)胞因子受體阻斷信號(hào)傳...